Avaliação da eficácia e segurança de formulações tópicas contendo ativos moduladores das enzimas LOX

Resumo

A lysyl oxidase (LOX) e as lysyl oxidase like (LOXL), são enzimas participantes no processo de regeneração cutânea. A nanotecnologia permite formular sistemas de veiculação eficientes para aplicação tópica como os transportadores lipídicos nanoestruturados (NLCs). O presente estudo teve como objetivo explorar a aplicação de compostos moduladores das enzimas LOXL2 para o controlo da regeneração cutânea. Para tal, foi avaliado o impacto de compostos inibidores da LOXL2 identificados pelo grupo CBIOS (8?,9?-epoxycoleon-U-quinone - EPCU e Pimarane 7, 15-isopimaradien-19-ol - PN1) na viabilidade de queratinócitos humanos. Foi testado o impacto de PN1, EPCU e BAPN na viabilidade de queratinócitos humanos (células HaCaT), recorrendo ao método de Cristal Violeta. O IC50 de inibição da LOXL2 de EPCU é de 58,3 uM, e no presente estudo os queratinócitos submetidos a concentração de 50 nM sofreram uma redução significativa da sua viabilidade. Relativamente ao PN1, o seu IC50 de inibição da LOXL2 é de 104,4 uM, e a partir dos resultados obtidos neste estudo com a concentração máxima de 200 nM, o composto não impactua a viabilidade celular, sendo este promissor para estudos futuros. Adicionalmente, foi verificada a possibilidade de veiculação um composto inibidor das LOXL2 comercialmente disponível, o ?-aminopropionitrilo (BAPN) através de NLCs. Relativamente à caracterização das NLCs com e sem BAPN, o diâmetro hidrodinâmico (Dh) das NLCs sem BAPN foram menores do que das NLCs com ativo, o seu índice de polidispersão (PDI) não ultrapassou 0,3 em ambos os casos, e o potencial zeta situou-se entre -18 e -22 mV. As NLCs com BAPN apresentaram um valor de pH mais alto em relação às sem BAPN. Os testes de avaliação da estabilidade demonstraram que as formulações se mantiveram inalteradas. A segurança e eficácia das NLCs sem BAPN foi testada num grupo de voluntários humanos. No que diz respeito às medições de parâmetros cutâneos após aplicação tópica, os parâmetros perda transépidermica de água (PTEA), eritema e hidratação revelaram que as NLCs têm boa compatibilidade, mas o aumento da hidratação foi pequeno. O trabalho permitiu concluir que as concentrações máximas dos inibidores testados que não induzem alterações na viabilidade das células são respetivamente: 500 nM para BAPN, 20 nM para EPCU e 200 nM para PN1. O BAPN foi incorporado em NLC, mas por ser ionizado reduziu o seu potencial zeta que poderá condicionar a estabilidade ao longo do tempo. As NLCs podem ser consideradas compatíveis com a pele. Estes dados evidenciam o potencial destes compostos como possíveis moduladores do processo de cicatrização, que poderão ser veiculados por NLCs. Palavras-chave: células HaCat, BAPN, viabilidade celular, NLC, regeneração cutânea

Data do prémio	2023
Idioma original	Português
Supervisor	Nuno Saraiva (Orientador) & Catarina Rosado (Orientador)